导(Dao)读(Du)：(?)最(Zui)近(Jin)，(?)加(Jia)州(Zhou)大(Da)学(Xue)圣(Sheng)地(Di)亚(Ya)哥(Ge)医(Yi)学(Xue)院(Yuan)细(Xi)胞(Bao)和(He)分(Fen)子(Zi)医(Yi)学(Xue)系(Xi)教(Jiao)授(Shou)Steven F. Dowdy博(Bo)士(Shi)带(Dai)领(Ling)的(De)研(Yan)究(Jiu)小(Xiao)组(Zu)，(?)在(Zai)国(Guo)际(Ji)著(Zhu)名(Ming)学(Xue)术(Shu)期(Qi)刊(Kan)《(?)Nucl Acids Res》(?)发(Fa)表(Biao)一(Yi)项(Xiang)研(Yan)究(Jiu)，(?)开(Kai)发(Fa)出(Chu)一(Yi)种(Zhong)高(Gao)效(Xiao)的(De)CRISPR/Cas9和(He)rAAV靶(Ba)向(Xiang)基(Ji)因(Yin)重(Zhong)组(Zu)方(Fang)法(Fa)，(?)通(Tong)过(Guo)将(Jiang)表(Biao)型(Xing)突(Tu)变(Bian)加(Jia)选(Xuan)择(Ze)性(Xing)siRNA位(Wei)点(Dian)同(Tong)时(Shi)引(Yin)入(Ru)一(Yi)个(Ge)基(Ji)因(Yin)的(De)一(Yi)个(Ge)等(Deng)位(Wei)基(Ji)因(Yin)中(Zhong)，(?)来(Lai)研(Yan)究(Jiu)哺(Bu)乳(Ru)动(Dong)物(Wu)的(De)基(Ji)因(Yin)功(Gong)能(Neng)。(?) 
      
      加(Jia)州(Zhou)大(Da)学(Xue)圣(Sheng)地(Di)亚(Ya)哥(Ge)医(Yi)学(Xue)院(Yuan)细(Xi)胞(Bao)和(He)分(Fen)子(Zi)医(Yi)学(Xue)系(Xi)教(Jiao)授(Shou)Steven F. Dowdy博(Bo)士(Shi)长(Chang)期(Qi)以(Yi)来(Lai)从(Cong)事(Shi)细(Xi)胞(Bao)周(Zhou)期(Qi)和(He)蛋(Dan)白(Bai)质(Zhi)转(Zhuan)导(Dao)领(Ling)域(Yu)的(De)研(Yan)究(Jiu)工(Gong)作(Zuo)。(?)最(Zui)近(Jin)，(?)他(Ta)带(Dai)领(Ling)的(De)课(Ke)题(Ti)组(Zu)先(Xian)后(Hou)在(Zai)多(Duo)家(Jia)国(Guo)际(Ji)著(Zhu)名(Ming)学(Xue)术(Shu)期(Qi)刊(Kan)发(Fa)表(Biao)重(Zhong)要(Yao)研(Yan)究(Jiu)成(Cheng)果(Guo)。(?)生(Sheng)物(Wu)通(Tong) www.ebiotrade.com

      在(Zai)2014年(Nian)7月(Yue)份(Fen)，(?)该(Gai)课(Ke)题(Ti)组(Zu)在(Zai)《(?)eLife》(?)发(Fa)表(Biao)的(De)一(Yi)篇(Pian)论(Lun)文(Wen)中(Zhong)表(Biao)示(Shi)，(?)他(Ta)们(Men)发(Fa)现(Xian)在(Zai)调(Diao)控(Kong)细(Xi)胞(Bao)周(Zhou)期(Qi)进(Jin)程(Cheng)中(Zhong)起(Qi)至(Zhi)关(Guan)重(Zhong)要(Yao)作(Zuo)用(Yong)的(De)一(Yi)种(Zhong)蛋(Dan)白(Bai)并(Bing)非(Fei)以(Yi)往(Wang)认(Ren)为(Wei)的(De)、(?)导(Dao)致(Zhi)一(Yi)个(Ge)重(Zhong)要(Yao)的(De)肿(Zhong)瘤(Liu)抑(Yi)制(Zhi)因(Yin)子(Zi)失(Shi)活(Huo)，(?)而(?)是(Shi)激(Ji)活(Huo)了(Liao)它(Ta)。(?)这(Zhe)一(Yi)研(Yan)究(Jiu)发(Fa)现(Xian)是(Shi)该(Gai)研(Yan)究(Jiu)小(Xiao)组(Zu)差(Cha)不(Bu)多(Duo)20年(Nian)研(Yan)究(Jiu)工(Gong)作(Zuo)的(De)结(Jie)果(Guo)，(?)它(Ta)完(Wan)全(Quan)颠(Dian)覆(Fu)了(Liao)原(Yuan)来(Lai)所(Suo)认(Ren)为(Wei)的(De)：(?)在(Zai)癌(Ai)症(Zheng)中(Zhong)一(Yi)种(Zhong)叫(Jiao)做(Zuo)p16-cyclin D的(De)最(Zui)常(Chang)见(Jian)遗(Yi)传(Chuan)信(Xin)号(Hao)通(Tong)路(Lu)突(Tu)变(Bian)驱(Qu)动(Dong)了(Liao)所(Suo)有(You)癌(Ai)细(Xi)胞(Bao)中(Zhong)细(Xi)胞(Bao)周(Zhou)期(Qi)进(Jin)程(Cheng)的(De)一(Yi)个(Ge)基(Ji)本(Ben)方(Fang)面(Mian)。(?)相(Xiang)关(Guan)阅(Yue)读(Du)：(?)20年(Nian)研(Yan)究(Jiu)颠(Dian)覆(Fu)癌(Ai)症(Zheng)教(Jiao)条(Tiao)。(?)接(Jie)着(Zhuo)在(Zai)11月(Yue)份(Fen)，(?)该(Gai)小(Xiao)组(Zu)在(Zai)Nature旗(Qi)下(Xia)子(Zi)刊(Kan)《(?)Nature Biotechnology》(?)发(Fa)表(Biao)了(Liao)他(Ta)们(Men)所(Suo)开(Kai)发(Fa)的(De)一(Yi)种(Zhong)新(Xin)技(Ji)术(Shu)：(?)采(Cai)用(Yong)化(Hua)学(Xue)方(Fang)法(Fa)来(Lai)伪(Wei)装(Zhuang)RNAi药(Yao)物(Wu)，(?)使(Shi)得(De)它(Ta)们(Men)能(Neng)够(Gou)进(Jin)入(Ru)到(Dao)细(Xi)胞(Bao)中(Zhong)。(?)一(Yi)旦(Dan)进(Jin)入(Ru)，(?)细(Xi)胞(Bao)机(Ji)器(Qi)会(Hui)将(Jiang)这(Zhe)些(Xie)伪(Wei)装(Zhuang)的(De)药(Yao)物(Wu)前(Qian)体(Ti)siRNNs转(Zhuan)变(Bian)为(Wei)活(Huo)性(Xing)RNAi药(Yao)物(Wu)。(?)

      新(Xin)年(Nian)伊(Yi)始(Shi)，(?)该(Gai)课(Ke)题(Ti)组(Zu)又(You)在(Zai)国(Guo)际(Ji)著(Zhu)名(Ming)学(Xue)术(Shu)期(Qi)刊(Kan)《(?)Nucl Acids Res》(?)发(Fa)表(Biao)题(Ti)为(Wei)“Efficient CRISPR-rAAV engineering of endogenous genes to study protein function by allele-specific RNAi”的(De)论(Lun)文(Wen)。(?)在(Zai)这(Zhe)项(Xiang)研(Yan)究(Jiu)中(Zhong)，(?)研(Yan)究(Jiu)人(Ren)员(Yuan)开(Kai)发(Fa)出(Chu)一(Yi)种(Zhong)高(Gao)效(Xiao)的(De)CRISPR/Cas9和(He)rAAV靶(Ba)向(Xiang)基(Ji)因(Yin)重(Zhong)组(Zu)方(Fang)法(Fa)，(?)通(Tong)过(Guo)将(Jiang)表(Biao)型(Xing)突(Tu)变(Bian)加(Jia)选(Xuan)择(Ze)性(Xing)siRNA位(Wei)点(Dian)同(Tong)时(Shi)引(Yin)入(Ru)一(Yi)个(Ge)基(Ji)因(Yin)的(De)一(Yi)个(Ge)等(Deng)位(Wei)基(Ji)因(Yin)中(Zhong)，(?)来(Lai)研(Yan)究(Jiu)哺(Bu)乳(Ru)动(Dong)物(Wu)的(De)基(Ji)因(Yin)功(Gong)能(Neng)，(?)可(Ke)允(Yun)许(Xu)在(Zai)同(Tong)一(Yi)细(Xi)胞(Bao)中(Zhong)进(Jin)行(Xing)野(Ye)生(Sheng)型(Xing)和(He)突(Tu)变(Bian)型(Xing)蛋(Dan)白(Bai)的(De)表(Biao)达(Da)。(?)

      研(Yan)究(Jiu)哺(Bu)乳(Ru)动(Dong)物(Wu)基(Ji)因(Yin)功(Gong)能(Neng)的(De)经(Jing)典(Dian)方(Fang)法(Fa)是(Shi)，(?)用(Yong)遗(Yi)传(Chuan)学(Xue)手(Shou)段(Duan)敲(Qiao)除(Chu)基(Ji)因(Yin)或(Huo)用(Yong)RNAi删(Shan)除(Chu)mRNA，(?)从(Cong)而(?)去(Qu)除(Chu)感(Gan)兴(Xing)趣(Qu)的(De)蛋(Dan)白(Bai)，(?)来(Lai)诱(You)导(Dao)一(Yi)种(Zhong)表(Biao)型(Xing)。(?)为(Wei)了(Liao)确(Que)认(Ren)所(Suo)靶(Ba)定(Ding)的(De)基(Ji)因(Yin)是(Shi)否(Fou)为(Wei)诱(You)变(Bian)基(Ji)因(Yin)，(?)我(Wo)们(Men)需(Xu)要(Yao)修(Xiu)复(Fu)相(Xiang)同(Tong)基(Ji)因(Yin)一(Yi)个(Ge)变(Bian)异(Yi)体(Ti)的(De)异(Yi)位(Wei)表(Biao)达(Da)所(Suo)引(Yin)起(Qi)的(De)功(Gong)能(Neng)表(Biao)型(Xing)缺(Que)失(Shi)。(?)遗(Yi)憾(Han)的(De)是(Shi)，(?)组(Zu)成(Cheng)型(Xing)基(Ji)因(Yin)敲(Qiao)除(Chu)可(Ke)激(Ji)活(Huo)一(Yi)种(Zhong)显(Xian)著(Zhu)损(Sun)害(Hai)表(Biao)型(Xing)和(He)基(Ji)因(Yin)功(Gong)能(Neng)的(De)代(Dai)偿(Chang)机(Ji)制(Zhi)。(?)

      相(Xiang)反(Fan)，(?)急(Ji)性(Xing)RNAi介(Jie)导(Dao)的(De)基(Ji)因(Yin)缺(Que)失(Shi)可(Ke)以(Yi)揭(Jie)示(Shi)更(Geng)多(Duo)的(De)功(Gong)能(Neng)，(?)并(Bing)带(Dai)来(Lai)一(Yi)个(Ge)更(Geng)为(Wei)详(Xiang)细(Xi)的(De)分(Fen)子(Zi)机(Ji)制(Zhi)。(?)然(Ran)而(?)，(?)修(Xiu)复(Fu)基(Ji)因(Yin)缺(Que)失(Shi)或(Huo)损(Sun)耗(Hao)，(?)同(Tong)样(Yang)充(Chong)满(Man)了(Liao)潜(Qian)在(Zai)危(Wei)险(Xian)。(?)通(Tong)常(Chang)使(Shi)用(Yong)蛋(Dan)白(Bai)质(Zhi)表(Biao)达(Da)系(Xi)统(Tong)——包(Bao)括(Kuo)诱(You)导(Dao)型(Xing)启(Qi)动(Dong)子(Zi)下(Xia)面(Mian)稳(Wen)定(Ding)的(De)整(Zheng)合(He)基(Ji)因(Yin)组(Zu)结(Jie)构(Gou)，(?)往(Wang)往(Wang)会(Hui)显(Xian)著(Zhu)过(Guo)度(Du)表(Biao)达(Da)修(Xiu)复(Fu)的(De)蛋(Dan)白(Bai)质(Zhi)，(?)从(Cong)而(?)改(Gai)变(Bian)蛋(Dan)白(Bai)质(Zhi)-蛋(Dan)白(Bai)质(Zhi)间(Jian)相(Xiang)互(Hu)作(Zuo)用(Yong)的(De)化(Hua)学(Xue)计(Ji)量(Liang)，(?)并(Bing)可(Ke)能(Neng)导(Dao)致(Zhi)潜(Qian)在(Zai)的(De)假(Jia)阳(Yang)性(Xing)“修(Xiu)复(Fu)”结(Jie)果(Guo)。(?)而(?)缺(Que)乏(Fa)适(Shi)当(Dang)的(De)基(Ji)因(Yin)调(Diao)控(Kong)，(?)可(Ke)以(Yi)通(Tong)过(Guo)使(Shi)用(Yong)小(Xiao)基(Ji)因(Yin)或(Huo)细(Xi)菌(Jun)人(Ren)工(Gong)染(Ran)色(Se)体(Ti)得(De)以(Yi)解(Jie)决(Jue)，(?)这(Zhe)些(Xie)方(Fang)法(Fa)对(Dui)细(Xi)胞(Bao)来(Lai)说(Shuo)是(Shi)一(Yi)种(Zhong)人(Ren)造(Zao)情(Qing)况(Kuang)。(?)

      为(Wei)了(Liao)弥(Mi)补(Bu)这(Zhe)一(Yi)差(Cha)距(Ju)，(?)该(Gai)研(Yan)究(Jiu)小(Xiao)组(Zu)开(Kai)发(Fa)出(Chu)一(Yi)种(Zhong)高(Gao)效(Xiao)的(De)CRISPR/Cas9和(He)rAAV靶(Ba)向(Xiang)基(Ji)因(Yin)重(Zhong)组(Zu)方(Fang)法(Fa)，(?)通(Tong)过(Guo)将(Jiang)表(Biao)型(Xing)突(Tu)变(Bian)加(Jia)上(Shang)选(Xuan)择(Ze)性(Xing)siRNA位(Wei)点(Dian)同(Tong)时(Shi)引(Yin)入(Ru)一(Yi)个(Ge)基(Ji)因(Yin)的(De)一(Yi)个(Ge)等(Deng)位(Wei)基(Ji)因(Yin)中(Zhong)，(?)来(Lai)研(Yan)究(Jiu)哺(Bu)乳(Ru)动(Dong)物(Wu)的(De)基(Ji)因(Yin)功(Gong)能(Neng)，(?)可(Ke)允(Yun)许(Xu)在(Zai)同(Tong)一(Yi)细(Xi)胞(Bao)中(Zhong)野(Ye)生(Sheng)型(Xing)和(He)突(Tu)变(Bian)型(Xing)蛋(Dan)白(Bai)的(De)表(Biao)达(Da)。(?)

      通(Tong)过(Guo)转(Zhuan)染(Ran)相(Xiang)应(Ying)的(De)表(Biao)达(Da)质(Zhi)粒(Li)和(He)筛(Shai)选(Xuan)siRNA序(Xu)列(Lie)，(?)研(Yan)究(Jiu)人(Ren)员(Yuan)可(Ke)容(Rong)易(Yi)地(Di)识(Shi)别(Bie)沉(Chen)默(Mo)的(De)点(Dian)突(Tu)变(Bian)，(?)以(Yi)产(Chan)生(Sheng)siSN序(Xu)列(Lie)。(?)rAAV和(He)等(Deng)位(Wei)基(Ji)因(Yin)特(Te)异(Yi)性(Xing)siRNA相(Xiang)结(Jie)合(He)，(?)可(Ke)让(Rang)我(Wo)们(Men)选(Xuan)择(Ze)性(Xing)地(Di)研(Yan)究(Jiu)相(Xiang)同(Tong)遗(Yi)传(Chuan)学(Xue)背(Bei)景(Jing)中(Zhong)内(Nei)源(Yuan)条(Tiao)件(Jian)下(Xia)表(Biao)达(Da)和(He)调(Diao)控(Kong)的(De)单(Dan)倍(Bei)不(Bu)足(Zu)（(?)siSN）(?)和(He)突(Tu)变(Bian)体(Ti)（(?)siWT）(?)。(?)更(Geng)重(Zhong)要(Yao)的(De)是(Shi)，(?)最(Zui)近(Jin)一(Yi)项(Xiang)单(Dan)细(Xi)胞(Bao)RNA-seq研(Yan)究(Jiu)确(Que)定(Ding)，(?)76%到(Dao)88%的(De)人(Ren)类(Lei)常(Chang)染(Ran)色(Se)体(Ti)基(Ji)因(Yin)是(Shi)双(Shuang)等(Deng)位(Wei)基(Ji)因(Yin)，(?)只(Zhi)有(You)12%到(Dao)24%的(De)是(Shi)单(Dan)等(Deng)位(Wei)基(Ji)因(Yin)。(?)这(Zhe)表(Biao)明(Ming)，(?)该(Gai)研(Yan)究(Jiu)小(Xiao)组(Zu)开(Kai)发(Fa)的(De)CRISPR–Cas9和(He) rAAV方(Fang)法(Fa)，(?)应(Ying)该(Gai)能(Neng)够(Gou)适(Shi)用(Yong)于(Yu)人(Ren)类(Lei)基(Ji)因(Yin)组(Zu)中(Zhong)绝(Jue)大(Da)部(Bu)分(Fen)的(De)基(Ji)因(Yin)。(?)

      总(Zong)的(De)来(Lai)说(Shuo)，(?)这(Zhe)种(Zhong)CRISPR加(Jia)rAAV方(Fang)法(Fa)，(?)对(Dui)于(Yu)研(Yan)究(Jiu)内(Nei)源(Yuan)基(Ji)因(Yin)功(Gong)能(Neng)具(Ju)有(You)广(Guang)泛(Fan)的(De)适(Shi)用(Yong)性(Xing)，(?)大(Da)大(Da)克(Ke)服(Fu)了(Liao)经(Jing)典(Dian)基(Ji)因(Yin)修(Xiu)复(Fu)方(Fang)法(Fa)的(De)相(Xiang)关(Guan)问(Wen)题(Ti)。(?)

(来(Lai)源(Yuan)：(?)生(Sheng)物(Wu)通(Tong))